本发明公开了一种新型酰肼希夫碱形成的自组装纳米粒子作为荧光探针使用，酰肼希夫碱在PBS缓冲液中自组装形成纳米体系，可用于人血清白蛋白（HSA）定性和定量检测。该探针优点是基于自组装和扭曲的分子内电荷转移机理，探针本身几乎没有荧光信号，与待测物作用后有明显的荧光增强现象，其合成路线简便，产率高，自组装形成纳米体系均匀快速，对待测物选择性好，灵敏度高。本发明的自组装纳米荧光探针可用于生物及临床检验样品中HSA的检测，具有良好的应用前景。