本发明涉及一种双功能氧化石墨烯复合材料及其检测贴壁细胞的应用。所述的双功能氧化石墨烯复合材料以氧化石墨烯为初始载体，一重功能化为接枝可在生理条件下识别细胞膜表面糖蛋白的硼酸单体，另一重功能化为装载酚酞显色剂。在使用方面，首先将双功能化氧化石墨烯复合纳米材料加入培养有贴壁细胞的细胞培养板中，孵育一段时间后，用磷酸盐缓冲液洗去未结合的双功能氧化石墨烯复合材料，调节pH并使用酶标仪测定吸光度，即可实现对该细胞培养板上待测细胞数目进行定量检测的目的。本发明提供的双功能氧化石墨烯复合材料及其检测贴壁细胞的应用，材料制备过程简单、成本低廉，检测方法方便快捷、稳定性良好，可以对贴壁细胞进行定量检测，具有广阔的应用前景。